SAŽETAK I OBJAŠNJENJE TEST
Leptospiroza se javlja širom svijeta i uobičajen je blagi do ozbiljan zdravstveni problem za ljude i životinje, posebno u područjima s toplom i vlažnom klimom.Prirodni rezervoari za leptospirozu su glodari, kao i veliki broj domaćih sisara.Ljudsku infekciju uzrokuje L. interrogans, patogeni član roda Leptospira.Infekcija se širi putem urina sa životinje domaćina.
Nakon infekcije, leptospire su prisutne u krvi sve dok se ne očiste nakon 4 do 7 dana nakon proizvodnje anti-L.interrogans antitijela, u početku IgM klase.Kultura krvi, urina i cerebrospinalne tečnosti je efikasan način potvrđivanja dijagnoze tokom 1. do 2. nedelje nakon izlaganja.Serološka detekcija antiL.interrogans antitijela je također uobičajena dijagnostička metoda.Testovi su dostupni u okviru ove kategorije: 1) Test mikroskopske aglutinacije (MAT);2) ELISA;3) Indirektni fluorescentni testovi na antitela (IFAT).Međutim, sve gore navedene metode zahtijevaju sofisticirano postrojenje i dobro obučene tehničare.
Leptospira IgG/IgM je jednostavan serološki test koji koristi antigene iz L. interrogans i istovremeno detektuje IgG i IgM antitela na ove mikroorganizme.Test može obaviti neobučeno ili minimalno kvalifikovano osoblje, bez glomazne laboratorijske opreme, a rezultat je dostupan u roku od 15 minuta.
PRINCIP
Leptospira IgG/IgM komplet za brzi test je bočni hromatografski
imunoesej.Test kaseta se sastoji od: 1) konjugata boje bordo boje koji sadrži rekombinantne antigene L. interrogans konjugirane sa koloidnim zlatom (konjugati Leptospira) i konjugati zečjeg IgG-zlata, 2) nitrocelulozne membranske trake koja sadrži dvije testne trake (M i G trake) i kontrolni opseg (C band).M traka je prethodno obložena monoklonskim anti-humanim IgM za detekciju anti-L.. interrogans IgM, G traka je prethodno obložena reagensima za detekciju anti-L.interrogans IgG, a C traka je prethodno obložena kozjim anti zečjim IgG.
Kada se adekvatna količina uzorka za ispitivanje unese u jažicu za uzorke na kaseti, uzorak migrira kapilarnim djelovanjem preko kasete.IgM anti-L.. ispitivači ako su prisutni u uzorku će se vezati za konjugate Leptospira.Imunokompleks se zatim hvata na membranu prethodno obloženim anti-humanim IgM antitelom, formirajući M traku bordo boje, što ukazuje na pozitivan rezultat testa na L.. interrogans IgM.IgG anti-L.. ispitivači ako su prisutni u uzorku će se vezati za konjugate Leptospira.Imunokompleks se zatim hvata prethodno obloženim reagensima na membrani, formirajući G traku bordo boje, što ukazuje na pozitivan rezultat testa na L.. interrogans IgG.
Odsustvo testnih traka (M i G) ukazuje na negativan rezultat.Test sadrži internu kontrolu (C traka) koja bi trebala pokazati bordo obojenu traku imunokompleksa konjugata kozjeg anti zečjeg IgG/zečjeg IgG-zlata bez obzira na razvoj boje na bilo kojoj od test traka.U suprotnom, rezultat ispitivanja je nevažeći i uzorak se mora ponovo testirati drugim uređajem.
